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米氏常数测定时的要求有哪些

时间:2026-02-06 17:24:12来源:

在测定米氏常数(Km)时,需确保实验条件的准确性与稳定性,以获得可靠数据。以下是主要要求:

要求项目 具体说明
酶浓度稳定 酶浓度应保持恒定,避免因酶活性变化影响结果。
底物浓度范围合理 底物浓度应在酶活性可测范围内,通常选择0.1-10倍Km值进行测试。
温度控制 实验温度需恒定,通常为25℃或37℃,以保证酶反应速率稳定。
pH值稳定 溶液pH应保持在酶最适pH范围内,避免pH波动影响酶活性。
反应时间控制 反应时间应处于初速度阶段,避免产物积累干扰测定。
重复性高 每组实验应重复多次,提高数据可靠性,减少误差。

综上,准确测定米氏常数需严格控制实验条件,确保数据真实有效。

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